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布氏菌病

发布时间:2017-09-27 23:01:27   来源:   标签:
内容提要: 布氏菌病是由布氏菌引起的一种人兽共患慢性传染病。临床上以流产、子宫内膜炎、睾丸炎、腱鞘炎、关节炎等为主要特征。人感染本病常发生波浪热,表现长期发热、关节痛、全身乏力。本病广泛分布于世界各地。经济动物中鹿最易感,犬、毛皮动物等亦常有报道。给经济动物..

布氏菌病是由布氏菌引起的一种人兽共患慢性传染病。临床上以流产、子宫内膜炎、睾丸炎、腱鞘炎、关节炎等为主要特征。人感染本病常发生波浪热,表现长期发热、关节痛、全身乏力。
本病广泛分布于世界各地。经济动物中鹿最易感,犬、毛皮动物等亦常有报道。给经济动物养殖业,尤其是养鹿业带来很大经济损失。
[病原体] 

布氏菌有6个生物种,19个生物型。即羊布氏菌(Br. melitensis)3个生物型,牛布氏菌(Br. abortus)9个生物型,猪布氏菌(Br. suis)4个生物型,犬布氏菌(Br. canis)、沙林鼠布氏菌(Br* neotomae)、绵羊布氏菌(Br. ovis)各有1个生物型。其中前四种我国有流行,后两种我国目前尚未见报道。
本菌初次分离时多呈球杆状,次代培养牛、猪种布氏菌渐成杆状,羊种布氏菌则仍保持球状。大小0. 6~1.5×0.5~0. 7t_Lm,多散在,很少形成短链。无芽胞、无鞭毛。在大多数情况下不形成荚膜。可被常用染料着色,但对某些染料具有迟染特性,以此设计的柯氏染色法对布氏菌具有鉴别意义,本菌被染成红色,而杂菌或其它物质被染成绿色。革兰氏阴性。
布氏菌为需氧或微需氧菌,适宜温度为37℃,pH值为6.6~7.4。初次分离培养时,对营养要求较高,须在含有血液、血清、肝汤、马铃薯浸液和葡萄糖的培养基中才能良好发育,而且生长缓慢,一般需7~14d或更长时间才能发育。牛种布氏菌的某些生物型初次培养时,须在5%~l0%C02的条件下才能生长。在血清肝汤琼脂中培养2~3d,发育为湿润、闪光、无色、圆形、表面隆起、边缘整齐的小菌落;肝汤肉汤中培养2~3d才能见到生长,呈轻度混浊,一周后发生白色粘稠沉淀,在老龄培养物中有时可看到菌膜;在马铃薯斜面上生长良好,2~3d后长出微黄色菌苔,色素溶于基质。
布氏菌含有两种抗原成分,即A抗原和M抗原。A抗原与M抗原在各种布氏菌中含量不同。羊布氏菌含M抗原较多,A抗原较少,M与A之比是20:1;牛布氏菌含A抗原较多,M抗原较少,A与M之比是20:1;猪布氏菌A抗原与M抗原之比为2:1。布氏菌与某些细菌具有共同抗原成分,如布氏菌血清能与小肠结肠耶氏菌0:9型、霍乱弧菌、土拉菌等发生交叉反应。
本菌在自然界中抵抗力较强。在污染的土壤和水中可存活l~4个月。在肉、乳食品中能存活2个月。对湿热的抵抗力与一般细菌相同,65 'C15min、70℃5min即死亡,煮沸立即杀死。对一般消毒药敏感,l0/o~3%石炭酸、0.1%升汞、2%~3%来苏儿、5%石灰乳数分钟可杀死本菌。对青霉素不敏感,链霉素、土霉素、庆大霉素、卡那霉素、氯霉素等对本菌均有抑制作用。
[流行病学]
传染源 患病动物和人是本病的传染源。传染源通过多种途径排菌,如流产物、阴道分泌物、尿、粪便、乳汁等,公兽精液中也有大量病原菌存在,随配种而散布传染。 、
传播途径 布氏菌具有高度的侵袭力和扩散力,可以通过皮肤(尤其是破损的皮肤)、粘膜接触感染;还可以由于食入被污染的饲料、患病动物肉、患畜乳汁、饮被污染的水经消化道传染;也可由于吸入被污染的空气经呼吸道感染;也可由交配经生殖道感染。
易感动物 多种动物和人对布氏菌均有不同程度的易感性,经济动物中鹿最易感,貂、狐等毛皮动物以及犬亦易感。家畜中牛、羊、猪最易感,也是经济动物危险传染源。
流行特征

本病无季节性,但以春季产仔季节较多见。一般公兽比母兽感染率高,成年动物比幼龄动物发病多。母兽患病主要表现流产,多数只流产一次,流产两次的较少。当饲料管理不良、光线不足、通风不良、动物舍拥挤、饲料不足等情况下,机体抵抗力降低时,可促使本病发生甚至流行。
[发病机理]

 布氏菌可经皮肤、粘膜、消化道、呼吸道、生殖道等多种途径侵入机体。无论是经那种途径,最终都能引起全身感染。侵入的布氏菌首先进入组织间隙,然后随淋巴系统达到局部淋巴结,在此被吞噬细胞所吞噬。被吞噬的细菌在细胞内生长繁殖,形成原发病灶,此期常不显临床症状,相当于潜伏期。布氏菌在淋巴结内繁殖到一定程度,冲破淋巴屏障,沿着淋巴管进入血流。布氏菌随血液循环到机体的某些部位,而产生转移性病灶。如侵入关节、腱鞘、骨髓、乳腺、睾丸、淋巴结等处,则发生关节炎、腱鞘炎、骨髓炎、乳腺炎、睾丸炎、淋巴结炎等。如侵入到妊娠母兽的子宫,在子宫粘膜下胎盘之间发育繁殖,弓l起纤维素性化脓性炎症或坏死性炎症,破坏了胎儿胎盘与母体胎盘之间的血液循环及其联系,断绝胎儿营养;或者病原菌于胎儿胎盘病变部,通过血液或羊进入胎儿体内,引起败血症。综上所述原因,造成胎儿死亡,发生流产。由于子宫粘膜与胎儿胎盘之间,发生纤维素性炎症、化脓性炎症或坏死性炎症,使胎儿胎盘与母体胎盘粘连,流产或分娩后,胎衣停滞,并发其它细菌感染,发生子宫炎、卵巢炎,往往起不育症。另外,布氏菌在体内各种因素作用下发生破坏。释放内毒素,临床上表现发冷、发热、出汗等症状。
[临床症状] 

潜伏期短者两周,长者可达半年以上,多数病例为隐性感染。发病时,多呈慢性经过,早期除体温升高、结膜炎等外,无明显可见症状。
鹿 妊娠母鹿常表现流产,流产胎儿多为死胎,流产前后以阴道流出污褐色或乳白色的脓性分泌物,有的母鹿伴发胎衣不下、子宫内膜炎、乳腺炎等。公鹿阴囊下垂,睾丸肿大,逐步变坚硬,严重者可发生坏死,有的表现关节尤其是膝关节和腕关节肿痛,出现踱行、站立困难或卧地不起。患鹿表现食欲不振、精神沉郁、被毛蓬乱无光泽、生长发育缓慢,体质瘦弱,皮下淋巴结肿大。
水貂 在静止期不出现显著临床症状。产仔期空怀率增高。流产,新生-仔兽在最初几天发死亡。
银黑狐 母兽表现流产、产后不孕和死胎。食欲下降,个别病例出现化脓性结膜炎。
犬 多为隐性感染或仅表现淋巴结炎。少数表现发热全身性症状。怀孕母犬常在怀孕40~50d时发生流产,流产前,病犬阴唇和阴道粘膜红肿,阴道内流出淡褐色或灰绿色分泌物。流产胎儿常发生部分自溶,皮下水肿、淤血和腹部皮下出血。部分母犬感染后并不发生流产,而是怀孕早期(配种后l0~20d)胚胎死亡并被母体吸收。流产后母犬,由于发生子宫内膜炎,往往屡配不孕。公犬常发生睾丸炎、前列腺炎、睾丸萎缩等。
[病理变化]
鹿 各组织器官都发生不同程度的病理变化,但主要病变在生殖器官和胎儿。流产胎衣绒毛膜下组织呈胶样浸润、充血和出血,并附有纤维素絮状物和脓性物。胎衣增厚,并有出血点。胎儿真胃中有淡黄色或白色粘液样絮状物;在胃、肠、膀胱的浆膜下及粘膜上有点状或带状出血;胸、腹腔有纤维素凝块,并有淡红色液体;皮下和肌间有浆液浸润;淋巴结及脾脏肿大,并有炎性坏死灶。子宫绒毛膜充血肿大,上面覆盖黄绿色渗出物;有的患鹿出现化脓性或卡他性子宫内膜炎。乳房发生实质变性或坏死;间质增生和上皮细胞浸润。公鹿精囊有出血点和坏死灶,睾丸与副睾常有坏死灶,鞘膜腔充满浆液性脓性渗出液;有的患鹿睾丸和副睾结缔组织增生、肥厚、肿胀及粘连。
银黑狐 无特征性变化,常见脾脏肿大、肝脏充血、淋巴结肿大,有时出血。
水貂 脾脏呈暗红色、肿胀,表面光滑、有光泽,常肿大4~5倍。淋巴结肿大,切面多汁。
犬 隐性感染犬一般无明显可见病理变化,临床症状明显的患犬,常可见关节炎、腱鞘炎、骨髓炎、乳腺炎、睾丸炎、淋巴结炎等变化。
[诊断] 

布氏菌病临床表现多样化,而特征症状又较少,故诊断应采用综合方法判定。又因为该病隐性感染较多,因此,必须进行细菌学和免疫学检查才能确诊。
(一)病原学检查
1.镜检 采取胎衣、绒毛膜水肿液、胎儿胃内容物或有病变的肝、脾、淋巴结、阴遭分泌物或血液等,制成抹片,用沙黄一孔雀绿染色、镜检,布氏菌染成红色,其它细菌或组织细胞染成 绿色或蓝色。
2.分离培养 常用加有染料的培养基培养,以便抑制杂菌生长。一般在甘油肝汤琼脂中加入1/20万结晶紫,进行划线培养,并将培养物分成两份,分别置于含5%~10%COz环境和大气下同时进行培养。经3~5d培养后,若有可疑菌落,可用快速凝集反应或血清分型、噬菌体分型法进行鉴定。
3.动物试验 常采用的实验动物为豚鼠。将病料5~10倍生理盐水乳剂注射于豚鼠腹腔或皮下,以后每隔7~lOd采血、检查血清中的抗体,如凝集价在1:5以上时.便认为有感染的可能。接种后5周左右,将豚鼠剖检,观察病理变化,并采取病料进行分离培养和镜检。若实验豚鼠为雄性,可引起睾丸炎。
(二)血清学检查 
l.直接凝集反应 是应用最广泛的血清学方法。动物感染布氏菌1~7d后,血液中就出现凝集素,主要为IgM。随后凝集滴度逐渐增高,主要为IgG和IgA。通常用试管凝集反应,大群检疫时也可甩玻板凝集反应。 
(1)试管凝集反应 操作时用O。5%石炭酸生理盐水将被检血清稀释成1: 25、l:50、l:100、l:200等4个稀释度,然后分别滴加1:20倍石炭酸生理盐水稀释的布氏菌抗原。放37‘℃感作后判定结果。被检血清1:50呈“++”或以上时,判为阳性;l:25呈“++”或以上判为可疑。判为可疑动物,3~4周后采血重检,若仍可疑,动物群中过去和现在都没有出现过阳性时,可判为阴性;否则判为阳性。
(2)玻板凝集反应 分别取被捡血清O。08、0.04、0.02、0.Olml,滴于准备好并划有方格的洁净玻璃板上,然后每格加入布氏菌玻板凝集抗原各0. 03ml.用牙签或火柴棒混匀每格中的抗原和血清,混匀时应从血清量最小的一格开始。混匀后将玻璃板放入30℃的温箱或酒精灯上微加热,并轻微摇动平板,于5~8min内记录结果。需注意的是每次检疫时必作阳性血清、阴性血清、抗原对照。在对照正确的情况下,于0. 04ml处凝集,判为阳性,于0.08ml处出现凝集则判为可疑。
2.间接凝集反应
(1)间接炭凝试验 将采过样的棉拭用生理盐水洗脱后,取待检液,滴于玻片的不同处2滴,再分别加入正常炭血清和布氏菌炭血清诊断液各l滴于其中。混匀后,若前者炭粉不发生凝集,后者炭粉被凝集,即为阳性反应。此法敏感性稍差,可检出每毫升含1亿以上的布氏菌标本,但受杂质干扰小。
(2)间接血凝试验 将被检标本液和生理盐水对照液,分别滴于V型塑料板的凹窝内,再加入布氏菌致敏的红细胞诊断液,充分混匀后,置37℃恒温箱中感作th,若阴性对照窝的红细胞呈圆点下沉于窝底,被检标本的窝底部出现平铺凝集红细胞,周围呈不整齐的边缘者为阳性反应。
3.荧光抗体技术 用荧光色素标记的布氏菌抗体去检查脏器或生理盐水洗脱液中的布氏菌。通常每毫升标本中含有5000个以上布氏菌即可获阳性结果,而且标本中存在的杂质对检验结果影响不大。
此外,还可用补体结合反应、对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验等。这些血清学方法因应用范围和条件限制,尚无广泛应用。
(三)变态反应检查 动物患过布氏菌病后,可出现明显变态反应。操作时,将布氏菌水解素0. 2ml注射于易于观察的皮肤内,注射后于24、48h各观察一次,发现局部肿胀,即判为阳性反应。由于经济动物捕捉、保定困难、此种方法除科研等外,一般现场很少应用。
[免疫与治疗] 感染布氏菌后形成的免疫,一般为带菌免疫,初次感染后,体内存在细菌,对再次感染有较强的免疫力。布氏菌病的免疫力由细胞免疫和体液免疫构成,但以细胞免疫为主;体液免疫起初产生IgM,有凝集细菌的作用,随后下降,继而产生IgG,但此种抗体系不完全抗体,不能直接凝集细菌,却能与细菌结合和固定补体。发病后,四型变态反应均存在,但以Ⅳ型变态反应为主。可应用皮肤变态反应检测得以证明,变态反应在布氏菌病经过中,存在时间较长,可达数年。经济动物布氏菌病疫苗研究较少,鹿常用羊布氏菌5号苗等。
各种动物的布氏菌病,尚无有效的治疗方法,一般采用淘汰病兽来防止本病的流行和扩散。
[防制措施]
(一)定期检疫 布病疫区的动物,每年均需定期检疫两次,阳性者及时淘汰。在鹿场每年配种前对种鹿要进行检疫,确认健康的方能参加配种。
(二)定期预防接种 对检疫阴性动物可试用家畜布氏菌病疫苗进行预防注射。
(三)加强饲养卫生管理,健全兽医卫生制度 对圈舍进行定期消毒,尤其是被污染的场所应用lO%石灰乳或5%火碱水等消毒。对流产的胎儿、胎衣、羊水及阴道分泌物应妥善处理,严格消毒、深埋或焚烧。流产胎儿落下的地方与羊水流到的地方,应当立即用10%石灰乳或lO%漂白粉彻底消毒。

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